Real–time cell analys is of cytotoxicity of dental bonding agents on human dental pulp cells

Abstract

Aim:To compare the cytotoxicity of dentin bonding agents on dental pulp cells through RTCA XCELLigence®impedancemethod, in order to investigate whether the self-etch adhesive would be more cytotoxic than two-step etch-and-rinse adhesive due to its higher acidity. Materials and Methods:Human dental pulp cells were obtained from healthy third molars extracted during routine clinical treatment. Two self-etching(Tokuyama Bond Force“Tb”;Shofu Beauti Bond“Bb”), and two total-etching(Dentsply Prime&Bond NT“Pb”;3M Adper Single Bond“Ab”) dentin-bonding agents(DBA) were diluted serially with culture medium at a ratio of 1:250, 1:500, 1:1000(v:v) and filtered. Cytotoxicity was identified by plating the pulp cells into the disposable E-plate 96 of xCELLigence® system. Results:Except for the 1:1000 dilution of Ab, each dilution of Ab was lower than the cell index of the control group at the 24th, and 48thhours. Furthermore, multiple comparison tests showed statistically significant differences between the control and each dilution of Ab (P = 0.000), except 1:1000 dilution of Ab at the 24thhour (P = 0.126). On the other hand, the cell indexes of 1:1000 dilution of Bb were higher than the cell index of the control at 24thand 48thhours, and there were statistically significant differences between them (P =0,000). At the 48th hour, 1:500 (P = 0.179) and 1:250 (P = 0.003) dilutions of Bb were lower than the control. Conclusion:Among the DBAs we used in our study, total-etch Ab showed the most cytotoxic effect. Conversely, self-etch Bb containing phosphoric acid monomer, showed the least cytotoxic effect. So, it may be more appropriate for clinical practices.Clinical relevance: Despite manufacturers’ claims, not all dentin bonding agents are biocompatible. Two-step etch-and-rinse adhesive may be less biocompatible than self-etch adhesive.

Amaç: Tek aĢamalı self-etch adezivlerin yüksek asiditesinden dolayı iki aĢamalı etch and rinse adezivlerden daha sitotoksik olupolmadığını değerlendirmek ve dentin bonding ajanların diĢ pulpa hücreleri üzerindeki sitotoksisitesini RTCA XCELLigence®empedans metodu ile karĢılaĢtırmaktır.Gereç ve Yöntemler: Ġnsan diĢi pulpa hücreleri rutin klinik tedavi sırasında çekilen sağlıklı üçüncü molar diĢlerden elde edildi.Ġkisi self-etch (Tokuyama Bond Force“Tb”;Shofu Beauti Bond“Bb”), ve ikisi total-etch (Dentsply Prime&Bond NT“Pb”;3M AdperSingle Bond“Ab”) olan dentin-bonding ajanlar (DBA) 1:250, 1:500, 1:1000 (v:v) oranlarında seyreltilerek, filtrelendi.Sitotoksisite pulpa hücrelerinin 96 kuyucuklu xCELLigence® sistemine ekilmesiyle belirlendi.Bulgular: Ab’nin 1:1000’lik dilüsyonu haricinde, Ab'nin her seyreltisi 24. ve 48. saatlerde kontrol grubunun hücre indeksindendüĢüktü. Ayrıca, çoklu karĢılaĢtırma testleri, kontrol ve Ab'nin her dilüsyonu arasında, 24. saatteki 1: 1000’lik Ab dilüsyonu (P =0.126) hariç, istatistiksel olarak anlamlı farklılıklar göstermiĢtir (P = 0.000). Öte yandan, Bb’nin 1: 1000’lik dilüsyonunun hücreindeksleri, 24. ve 48. saatlerde kontrolün hücre indeksinden daha yüksekti ve aralarında istatistiksel olarak anlamlı farklar vardı(P = 0,000). 48. saatte, Bb’nin 1: 500 (P = 0.179) ve 1: 250 (P = 0.003)’lik dilüsyonları kontrolden daha düĢüktü.Sonuç: ÇalıĢmamızda kullandığımız DBA'lar arasında total etch Ab en sitotoksik etkiyi göstermiĢtir. Bunun tersine, fosforik asitmonomeri içeren self-etch Bb, en az sitotoksik etkiyi göstermiĢtir. Bu nedenle, Bb klinik uygulamalar için daha uygun olabilir.Klinik anlamı: Üreticilerin iddialarına rağmen, tüm dentin bonding ajanları biyouyumlu değildir. Ġki aĢamalı total-etch adezivler,self-etch adezivlerden daha az biyouyumlu olabilmektedir.